親水色譜柱是一種專門設(shè)計(jì)用于分離親水性和極性化合物的色譜柱。利用固定相上的親水性基團(tuán)與樣品中的極性基團(tuán)之間的相互作用，實(shí)現(xiàn)對(duì)極性化合物的有效分離。其工作原理基于親水作用和可能的離子交換作用。在分離過(guò)程中，水相固定相上的親水性基團(tuán)與待分離物質(zhì)中的極性基團(tuán)發(fā)生相互作用，從而實(shí)現(xiàn)物質(zhì)的分離和純化。
以下是使用
親水色譜柱時(shí)需要注意的操作事項(xiàng)：
1、選擇合適的流動(dòng)相
選擇合適溶劑：流動(dòng)相應(yīng)選用色譜純?cè)噭⒏呒兯螂p蒸水。酸堿液及緩沖液需經(jīng)過(guò)濾后使用，以防止雜質(zhì)影響分析結(jié)果。
更換頻率：水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換（一般不超過(guò)2天），防止長(zhǎng)菌變質(zhì)。
2、樣品處理
樣品過(guò)濾：采用過(guò)濾或離心方法處理樣品，確保樣品中不含固體顆粒。
樣品溶解：用流動(dòng)相或比流動(dòng)相弱（若為反相柱，則極性比流動(dòng)相大；若為正相柱，則極性比流動(dòng)相小）的溶劑制備樣品溶液。
3、色譜柱操作
保護(hù)柱使用：使用保護(hù)柱可以延長(zhǎng)分析柱的使用壽命。
沖洗步驟：如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相，反相色譜柱使用后，先用水或低濃度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇沖洗。
4、設(shè)備操作規(guī)程
開(kāi)機(jī)步驟：打開(kāi)所有電源，待自檢通過(guò)；在計(jì)算機(jī)中雙擊LC SOLUTION Lite圖標(biāo)，進(jìn)入工作站。
設(shè)置儀器方法：主要為L(zhǎng)C采集時(shí)間、泵總流速及各泵流速、檢測(cè)器波長(zhǎng)、柱溫箱溫度等；設(shè)置完成后，另存方法文件，并下載至設(shè)備。
基線平穩(wěn)：點(diǎn)擊圖標(biāo)（儀器開(kāi)/關(guān)），系統(tǒng)開(kāi)始運(yùn)行，觀察檢測(cè)器基線變化，如果基線平直穩(wěn)定不變，即認(rèn)為接近平衡，可以調(diào)零等待。
進(jìn)樣分析：點(diǎn)擊單次運(yùn)行，編輯樣品參數(shù)（樣品名，方法文件名，數(shù)據(jù)存儲(chǔ)路徑—數(shù)據(jù)文件名，進(jìn)樣量等），點(diǎn)擊確定后，樣品進(jìn)樣。
數(shù)據(jù)處理：文件---打開(kāi)數(shù)據(jù)文件---視圖---峰表，則可以查看保留時(shí)間，峰高，峰面積等，之后用Excel做標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)未知樣品的峰面積求濃度。
關(guān)機(jī)步驟：分析結(jié)束后，更換洗液清洗流路系統(tǒng)（如用緩沖液，先用水清洗半小時(shí)），再有機(jī)溶劑清洗30分鐘以上，最后用有機(jī)溶劑封存；停止系統(tǒng)運(yùn)行，在實(shí)時(shí)分析工作站中，點(diǎn)儀器開(kāi)/關(guān)鍵即停止所有單元工作；退出實(shí)時(shí)分析界面，再完q退出；關(guān)閉單元電源開(kāi)關(guān)。
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